水质叶绿素 a 测定仪的操作步骤可能因不同的型号和品牌而有所差异,但一般来说,主要包括以下几个步骤:
检查仪器:检查水质叶绿素 a 测定仪是否有损坏,各部件是否连接正常,显示屏是否能正常显示等。确保仪器处于良好的工作状态。
预热:接通电源,打开仪器开关,按照仪器说明书的要求进行预热,一般预热时间为 15-30 分钟,以使仪器达到稳定的工作状态。
校准
零点校准:使用去离子水或蒸馏水作为空白样品,将比色皿或探头清洗干净后,装入适量的空白样品,放入仪器的样品池中或插入水样中,按照仪器操作界面上的提示进行零点校准操作,使仪器读数为零。
标准曲线校准:准备一系列已知浓度的叶绿素 a 标准溶液,浓度范围应涵盖预期水样中叶绿素 a 的浓度。将标准溶液依次倒入比色皿或使用探头直接测量,按照浓度由低到高的顺序,在仪器上测量并记录每个标准溶液的吸光度或荧光值等响应信号。然后根据测量数据,在仪器上绘制标准曲线,或者将数据导入计算机,使用相关软件绘制标准曲线。有些高级的测定仪可以自动进行标准曲线的绘制和拟合。
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采集水样:使用合适的采样器具,如采水器,在需要测定的水体中采集水样。采样时应注意避免搅动水底的沉积物,以防止影响水样的代表性。一般采集表层水样即可,但如果需要了解不同深度的叶绿素 a 含量,则应按照分层采样的方法进行采集。
过滤水样:将采集到的水样通过 0.45μm 或更小孔径的滤膜进行过滤,以去除水样中的悬浮物和其他杂质。过滤过程应尽量保持操作的规范性,避免样品的损失或污染。
提取叶绿素 a:将滤膜放入研钵中,加入适量的提取剂,如 90% 的丙酮溶液,研磨至滤膜破碎,使叶绿素 a 充分溶解在提取剂中。然后将研磨后的溶液转移至离心管中,在一定转速下离心,使溶液澄清。将上清液转移至比色皿中,用于测定。
放入样品:将处理好的样品比色皿小心放入仪器的样品池中,确保比色皿放置平稳且位置正确。如果使用的是探头式测定仪,则将探头插入样品溶液中,注意避免探头与容器壁或底部接触。
测量读数:按照仪器操作界面上的提示,选择合适的测量模式,如吸光度测量或荧光测量等,然后启动测量程序。仪器将自动测量样品的吸光度或荧光值等,并在显示屏上显示测量结果。
记录数据:记录仪器显示的测量数据,包括吸光度、荧光值等原始数据以及根据标准曲线计算得到的叶绿素 a 浓度值。同时,记录测量时的环境条件,如温度、时间等,以备后续分析使用。
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数据处理:根据测量得到的数据,结合标准曲线方程,计算水样中叶绿素 a 的浓度。如果进行了多次测量,则计算平均值、标准差等统计参数,以评估测量的准确性和可靠性。
结果报告:将测量结果按照规定的格式进行报告,包括水样的采集地点、时间、叶绿素 a 浓度以及其他相关信息。报告应清晰、准确、完整,以便为后续的水质分析和研究提供可靠的数据支持。
清洗仪器:取出比色皿或探头,用去离子水或蒸馏水冲洗干净,去除残留的样品溶液。对于比色皿,还可以使用适当的清洗剂进行浸泡清洗,然后用蒸馏水冲洗干净,晾干备用。
关闭电源:关闭仪器电源开关,拔掉电源插头。将仪器妥善放置在干燥、通风的地方,避免仪器受到损坏或受潮。